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慢病毒包裝試劑盒

簡要描述:中文名稱:慢病毒包裝試劑盒 Lentiviral Packaging Kit

英文名稱:Lentiviral Packaging Kit

規(guī)格:10 Test

保質(zhì)期:1年

保存條件:A盒——-15~-25℃,B盒——2~8℃

產(chǎn)品關鍵詞:慢病毒、慢病毒包裝、慢病毒濃縮液、細胞轉(zhuǎn)染

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2024-11-13
  • 訪  問  量:185

產(chǎn)品分類

Product Category

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詳細介紹

品牌IPHASE供貨周期現(xiàn)貨
應用領域醫(yī)療衛(wèi)生,食品,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合

慢病毒包裝試劑盒 Lentiviral Packaging Kit

產(chǎn)品介紹

    慢病毒經(jīng)濃縮后,可以高效地將基因穩(wěn)定地整合到宿主基因組中,特別適合用于難以通過常規(guī)方法轉(zhuǎn)染的細胞,如神經(jīng)細胞、干細胞和免疫細胞如原代T細胞等。IPHASE 慢病毒包裝試劑盒提供了慢病毒包裝所需用到的所有試劑,包含了慢病毒包裝質(zhì)?;旌衔風entivirus Packaging Plasmid Mix、轉(zhuǎn)染試劑Transfect Reagent、對照質(zhì)粒eGFP Plasmid (AMP+)和慢病毒濃縮液Lentivirus Titer-enhanced Solution,省去了試驗前準備的繁瑣過程,可直接使用,通過使用配套的濃縮液可以有效提高病毒滴度,提高慢病毒轉(zhuǎn)染便利性。試劑盒中各組成成分經(jīng)過嚴格的質(zhì)量檢測,實驗結(jié)果準確、可靠、重現(xiàn)性好。

慢病毒包裝試劑盒


產(chǎn)品詳情

中文名稱:慢病毒包裝試劑盒 Lentiviral Packaging Kit

英文名稱:Lentiviral Packaging Kit

規(guī)格:10 Test

保質(zhì)期:1年

保存條件:A盒——-15~-25℃,B盒——2~8℃

產(chǎn)品關鍵詞:慢病毒、慢病毒包裝、慢病毒濃縮液、細胞轉(zhuǎn)染

產(chǎn)品組分:


名稱

規(guī)格

數(shù)量

Lentivirus Packaging Plasmid Mix

120 μL

1

eGFP Plasmid

50μL

1

Transfect Reagent

1 mL

1

Lentivirus Titer-enhanced Solution

50 mL

1


使用方法

    提前制備轉(zhuǎn)染所需的293T細胞,使用Transfect Reagent把包裝質(zhì)粒、包膜質(zhì)粒和目標DNA eGFP 質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染進293T細胞,細胞轉(zhuǎn)染6h后把培養(yǎng)基更換為完-全培養(yǎng)基,培養(yǎng)48h-72h,收集富含慢病毒顆粒的細胞上清液,并使用lentivirus titer-enhanced solution對收集的上清液濃縮后得到高滴度的慢病毒濃縮液,可在293T細胞或者慢病毒滴度試劑盒中測定病毒滴度。在一定滴度范圍內(nèi)的慢病毒顆粒可以滿足大部分體內(nèi)體外實驗需求。

慢病毒包裝試劑盒


1 細胞準備

1)將處于對數(shù)增長期的293T細胞按照6million/皿的兩傳代到100mm培養(yǎng)皿中,置于5%的二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),當細胞融合率達到80%左右時準備轉(zhuǎn)染。

2)轉(zhuǎn)染前1~2 h按照12mL/皿的量為需要轉(zhuǎn)染的細胞更換新鮮的DMEM基礎培養(yǎng)基。

注:293T細胞貼壁性不好,更換培養(yǎng)基時應盡量避免沖起293T細胞。


2   轉(zhuǎn)染

1)  請于冰浴條件下解凍Lenti Packaging Plasmid Mix和eGFP Plasmid,并混合均勻。

注:Lenti Packaging Plasmid Mix和eGFP Plasmid需在-20℃冷凍保存,切勿反復凍融,若一次用不完,可于第一次化凍后按照需求量分裝并凍存。

2)準備兩個1.5ml無菌離心管,分別標記為管A和管B,按照以下表格進行體系配制:


組分名稱

A

B

DMEM基礎培養(yǎng)基

0.5 mL

0.5 mL

lenti Packaging Plasmid Mix

10 μL

/

含目的DNA的質(zhì)粒

10 μg

/

Transfect Reagent

/

72 μL


3)混合均勻,并于室溫條件下平衡5min,備用。

4)將管A和管B的溶液合并,混合均勻后于室溫放置 18~20min 。

5)將混合液均勻滴加到預處理好的293T細胞培養(yǎng)皿中,放置在 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

6)轉(zhuǎn)染6h~8h后,小心吸掉細胞培養(yǎng)液棄于盛有消毒液的廢液杯中,然后加15mL完-全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

注:此時培養(yǎng)基與所用的移液槍頭等都已含有少量的病毒,必須經(jīng)消毒液浸泡處理后才能丟棄。


3 收集與濃縮

1)換液48h~72h后,轉(zhuǎn)移細胞上清液至50mL離心管,4℃,500g離心5min。

2)  收集離心后上清液,使用0.45μm濾器過濾后至新的離心管中。

3)按1:3比例加入Lentivirus Titer-enhanced Solution進離心后的上清液,2℃~8℃冰箱放置過夜。

4)4℃,1500g 離心 60min,棄上清。

5)加入原1/10或1/100的DMEM基礎培養(yǎng)基,建議使用轉(zhuǎn)染目標細胞培養(yǎng)基重懸,于-60℃~-90℃冰箱保存。

慢病毒包裝試劑盒


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慢病毒包裝試劑盒


匯智和源從匯智泰康獨立而來,“IPHASE"為核心產(chǎn)品品牌,公司致力于為創(chuàng)新藥研發(fā)企業(yè)及生命科學研究機構(gòu)提供高品質(zhì)的試劑產(chǎn)品,品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research"。


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