說說一相代謝穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)原理
更新時(shí)間:2022-07-19 點(diǎn)擊次數(shù):2014
藥物在一相代謝反應(yīng)中主要發(fā)生氧化、還原和水解的反應(yīng),經(jīng)過Ⅰ相代謝反應(yīng),藥物可能帶有一些極性基團(tuán),如羥基、羧基等。
氧化反應(yīng)是最多見的第Ⅰ相反應(yīng),單加氧酶系是氧化異源物最重要的酶,單加氧酶主要存在于滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的微粒體中,能催化烷烴、烯烴、芳烴和類固醇等多種物質(zhì)進(jìn)行氧化。由細(xì)胞色素P450、NADPH+H+、NADPH-細(xì)胞色素P450還原酶(以FAD為輔基的黃酶),催化基本反應(yīng)為:
RH+O2+NADPH+H+→ROH+NADP++H2O
單加氧酶能直接激活氧分子,使其中一個(gè)氧原子直接加入底物分子中形成羥化物或環(huán)氧化物,另一個(gè)氧原子則被NADPH還原為水。由于一個(gè)氧分子發(fā)揮了兩種功能,故單加氧酶系又稱為混合功能氧化酶;又因底物的氧化產(chǎn)物是羥化物,所以又稱為羥化酶。
一相代謝穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)原理
肝藥酶CYP即細(xì)胞色素P450氧化酶(CYP450),屬于單加氧酶(momooxygenase),也稱肝微粒體混合功能氧化酶,多位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體內(nèi)壁上,參與藥物、致癌物、類固醇激素和脂肪酸等多種內(nèi)、外源性物質(zhì)代謝。肝藥酶CYP氧化還原酶(POR)是所有肝微粒體酶的電子供體,通過還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPH)將電子傳遞給CYP450酶,CYP450酶得到電子后再與底物發(fā)生氧化還原反應(yīng),從而發(fā)揮代謝活性。
肝微粒體中包含了大部分Ⅰ相酶,其中最重要的是以CYP450為主要成分的微粒體混合功能氧化酶系統(tǒng),在用肝微粒體進(jìn)行研究時(shí),如加入相應(yīng)的輔助因子NADPH,則可重組體外代謝體系,從而通過體外溫孵法進(jìn)行一相代謝穩(wěn)定性研究。